اوستيوآرٿرتس (OA) هڏن جي جوڑوں جي ڊگهي عرصي واري دائمي خراب ٿيندڙ بيمارين مان هڪ آهي جيڪا 65 سالن کان مٿي عمر وارن ماڻهن کي متاثر ڪري ٿي [
1]. عام طور تي، OA مريضن ۾ خراب ٿيل ڪارٽيليج، سوزش ٿيل سينوويم، ۽ خراب ٿيل ڪنڊروسائٽس جي تشخيص ڪئي ويندي آهي، جيڪي درد ۽ جسماني پريشاني کي جنم ڏين ٿا [
2]. گٿريت جو درد بنيادي طور تي سوزش جي ڪري جوڑوں ۾ ڪارٽيليج جي خراب ٿيڻ جي ڪري ٿيندو آهي، ۽ جڏهن ڪارٽيليج کي سخت نقصان پهچندو آهي ته هڏا هڪ ٻئي سان ٽڪرائجي سگهن ٿا جنهن جي ڪري ناقابل برداشت درد ۽ جسماني تڪليف پيدا ٿي سگهي ٿي [
3]. سوزش واري ثالثن جي شموليت، درد، سوجن، ۽ جوڑوں جي سختي جهڙين علامتن سان چڱي طرح دستاويز ٿيل آهي. OA جي مريضن ۾، سوزش واري سائيٽوڪائنز، جيڪي ڪارٽيليج ۽ سبڪونڊرل هڏن جي ڪٽائي جو سبب بڻجن ٿيون، سائنوويل فلوئڊ ۾ مليون آهن [
4]. ٻه وڏيون شڪايتون جيڪي OA مريضن کي عام طور تي ٿينديون آهن اهي آهن درد ۽ سينوويل سوزش. تنهن ڪري موجوده OA علاج جا بنيادي مقصد درد ۽ سوزش کي گهٽائڻ آهن. [
5]. جيتوڻيڪ موجود OA علاج، جن ۾ غير اسٽيرائيڊل ۽ اسٽيرائيڊل دوائون شامل آهن، درد ۽ سوزش کي گهٽائڻ ۾ اثرائتي ثابت ٿيون آهن، انهن دوائن جي ڊگهي مدت جي استعمال جا صحت تي سخت نتيجا آهن جهڙوڪ دل، گيسٽرو-انٽيسٽينل، ۽ گردن جي خرابي [
6]. تنهن ڪري، اوستيوآرٿرتس جي علاج لاءِ گهٽ ضمني اثرات سان هڪ وڌيڪ اثرائتي دوا تيار ڪرڻ جي ضرورت آهي.
قدرتي صحت جون شيون محفوظ ۽ آساني سان دستياب هجڻ جي ڪري وڌيڪ مشهور ٿي رهيون آهن [
7]. روايتي ڪورين دوائن ڪيترن ئي سوزش واري بيمارين جي خلاف اثرائتي ثابت ڪئي آهي، جن ۾ گٿريت شامل آهي [
8]. آڪلينڊيا لپا ڊي سي پنهنجي دوائن جي خاصيتن لاءِ مشهور آهي، جيئن درد کي گهٽائڻ ۽ پيٽ کي آرام ڏيڻ لاءِ ڪيو جي گردش کي وڌائڻ، ۽ روايتي طور تي قدرتي درد جي دوا طور استعمال ڪيو ويندو آهي [
9]. پوئين رپورٽون ٻڌائين ٿيون ته A. lappa ۾ سوزش مخالف خاصيتون آهن [
10,
11]، درد دور ڪندڙ [
12]، ڪينسر مخالف [
13]، ۽ گيسٽرو پروٽيڪٽو [
14] اثرات. اي. لپا جون مختلف حياتياتي سرگرميون ان جي مکيه فعال مرڪبن جي ڪري ٿين ٿيون: ڪوسٽونولائڊ، ڊيهائيڊروڪوسٽس ليڪٽون، ڊائي هائيڊروڪوسٽونولائڊ، ڪوسٽوسليڪٽون، α-ڪوسٽول، سوسوريا ليڪٽون ۽ ڪوسٽوسليڪٽون [
15]. اڳوڻي مطالعي جو دعويٰ آهي ته ڪوسٽونولائڊ لپوپوليسڪرائڊ (LPS) ۾ سوزش مخالف خاصيتون ڏيکاريون، جنهن NF-kB ۽ گرمي جھٽڪو پروٽين رستي جي ضابطي ذريعي ميڪروفيجز کي متاثر ڪيو [
16,
17]. تاهم، ڪنهن به مطالعي ۾ OA جي علاج لاءِ A. lappa جي امڪاني سرگرمين جي جاچ نه ڪئي وئي آهي. موجوده تحقيق ۾ (مونوسوڊيم-آئوڊواسيٽيٽ) MIA ۽ ايسٽڪ ايسڊ-حوصلہ افزائي روڊنٽ ماڊل استعمال ڪندي OA جي خلاف A. lappa جي علاج جي اثرات جي جاچ ڪئي وئي آهي.
مونوسوڊيم-آئوڊواسيٽيٽ (MIA) جانورن ۾ درد جي رويي ۽ OA جي پيٿوفزيولوجيڪل خاصيتن جي پيداوار لاءِ مشهور طور تي استعمال ڪيو ويندو آهي [
18,
19,
20]. جڏهن گوڏن جي جوڑوں ۾ انجڪشن ڪيو ويندو آهي، MIA ڪنڊروسائيٽ ميٽابولزم کي خراب ڪري ٿو ۽ سوزش ۽ سوزش جي علامتن کي جنم ڏئي ٿو، جهڙوڪ ڪارٽيلج ۽ سبڪونڊرل هڏن جو خاتمو، OA جون بنيادي علامتون [
18]. ايسٽڪ ايسڊ سان ٿيندڙ لکڻ واري ردعمل کي وڏي پيماني تي جانورن ۾ پردي جي درد جي تخليق طور سمجهيو ويندو آهي جتي سوزش واري درد کي مقداري طور تي ماپي سگهجي ٿو [
19]. مائوس ميڪروفيج سيل لائن، RAW264.7، سوزش جي سيلولر ردعمل جو مطالعو ڪرڻ لاءِ مشهور طور تي استعمال ڪئي ويندي آهي. LPS سان چالو ٿيڻ تي، RAW264 ميڪروفيج سوزش جي رستن کي چالو ڪن ٿا ۽ ڪيترائي سوزش وچولي خارج ڪن ٿا، جهڙوڪ TNF-α، COX-2، IL-1β، iNOS، ۽ IL-6 [
20]. هن مطالعي ۾ MIA جانورن جي ماڊل، ايسٽڪ ايسڊ-انڊيوسڊ جانورن جي ماڊل، ۽ LPS-فعال RAW264.7 سيلز ۾ OA جي خلاف A. lappa جي اينٽي-نوسسپيٽو ۽ اينٽي-انفلاميٽري اثرات جو جائزو ورتو ويو آهي.
2. مواد ۽ طريقا
2.1. ٻوٽن جو مواد
تجربي ۾ استعمال ٿيندڙ A. lappa DC جي خشڪ جڙ Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea) کان حاصل ڪئي وئي هئي. ان جي سڃاڻپ پروفيسر ڊونگون لي، ڊپارٽمينٽ آف هربل فارماسولوجي، ڪرنل آف ڪورين ميڊيسن، گچون يونيورسٽي پاران ڪئي وئي هئي، ۽ واؤچر نموني نمبر 18060301 طور جمع ڪرايو ويو هو.
2.2. اي. لپا ڪڍڻ جو HPLC تجزيو
A. lappa کي ريفلوڪس اپريٽس (ڊسٽلڊ واٽر، 100 °C تي 3 ڪلاڪ) استعمال ڪندي ڪڍيو ويو. ڪڍيل محلول کي گهٽ دٻاءُ واري بخارات استعمال ڪندي فلٽر ڪيو ويو ۽ گاڑھو ڪيو ويو. A. lappa ڪڍڻ جي پيداوار −80 °C هيٺ فريز-ڊرائي ڪرڻ کان پوءِ 44.69٪ هئي. A. lappa جو ڪروميٽوگرافڪ تجزيو 1260 انفينٽيⅡ HPLC-سسٽم (Agilent، Pal Alto، CA، USA) استعمال ڪندي ڳنڍيل HPLC سان ڪيو ويو. ڪروميٽو علحدگي لاءِ، EclipseXDB C18 ڪالم (4.6 × 250 mm، 5 µm، Agilent) 35 °C تي استعمال ڪيو ويو. نموني جي ڪل 100 mg کي 50% ميٿانول جي 10 mL ۾ ملائي ڇڏيو ويو ۽ 10 منٽن لاءِ سونيڪٽ ڪيو ويو. نمونن کي 0.45 μm جي سرنج فلٽر (واٽرز ڪارپوريشن، ملفورڊ، MA، USA) سان فلٽر ڪيو ويو. موبائل فيز جي جوڙجڪ 0.1٪ فاسفورڪ ايسڊ (A) ۽ ايسٽونائيٽرائيل (B) هئي ۽ ڪالم کي هن ريت ايلوٽ ڪيو ويو: 0-60 منٽ، 0٪؛ 60-65 منٽ، 100٪؛ 65-67 منٽ، 100٪؛ 67-72 منٽ، 0٪ سالوينٽ B جنهن جي وهڪري جي شرح 1.0 mL/منٽ هئي. 10 μL جي انجيڪشن حجم استعمال ڪندي 210 nm تي پاڻي جو مشاهدو ڪيو ويو. تجزيو ٽن نقلن ۾ ڪيو ويو.
2.3. جانورن جي رهائش ۽ انتظام
5 هفتن جي عمر جا نر اسپراگ-ڊولي (ايس ڊي) چوها ۽ 6 هفتن جي عمر جا نر آءِ سي آر چوها سامتاڪو بايو ڪوريا (گيونگگي-ڊو، ڪوريا) کان خريد ڪيا ويا. جانورن کي مسلسل گرمي پد (22 ± 2 °C) ۽ نمي (55 ± 10٪) ۽ 12/12 ڪلاڪ جي هلڪي/ڪارو چڪر استعمال ڪندي ڪمري ۾ رکيو ويو. تجربو شروع ٿيڻ کان اڳ جانورن کي هڪ هفتي کان وڌيڪ عرصي تائين حالت کان واقف ڪيو ويو. جانورن کي کاڌ خوراڪ ۽ پاڻي جي هڪ آزاد فراهمي هئي. گچون يونيورسٽي (GIACUC-R2019003) ۾ جانورن جي سنڀال ۽ سنڀال لاءِ موجوده اخلاقي قاعدن جي سڀني جانورن جي تجرباتي طريقيڪار ۾ سختي سان پيروي ڪئي وئي. مطالعي کي تحقيق ڪندڙ-انڌي ۽ متوازي آزمائش لاءِ ڊزائين ڪيو ويو هو. اسان جانورن جي تجرباتي اخلاقيات ڪميٽي جي هدايتن مطابق يوٿانيسيا جي طريقي تي عمل ڪيو.
2.4. MIA انجڪشن ۽ علاج
چوٿين کي بي ترتيب طور تي 4 گروپن ۾ ورهايو ويو، يعني شيم، ڪنٽرول، انڊوميٿيسن، ۽ اي. لاپا. 2٪ آئسوفلورين O2 مرکب سان بي هوشي ڪرڻ جي ڪري، چوٿين کي 50 μL MIA (40 mg/m; سگما-الڊرچ، سينٽ لوئس، MO، USA) استعمال ڪندي گوڏن جي جوڑوں ۾ اندروني طور تي انجڪشن ڪيو ويو ته جيئن تجرباتي OA ڏانهن وٺي وڃي. علاج هيٺ ڏنل طور تي ڪيا ويا: ڪنٽرول ۽ شيم گروپن کي صرف AIN-93G بنيادي غذا سان برقرار رکيو ويو. صرف، انڊوميٿيسن گروپ کي AIN-93G غذا ۾ شامل انڊوميٿيسن (3 mg/kg) فراهم ڪيو ويو ۽ A. لاپا 300 mg/kg گروپ کي A. لاپا (300 mg/kg) سان گڏ AIN-93G غذا ۾ مقرر ڪيو ويو. علاج OA انڊڪشن جي ڏينهن کان وٺي 24 ڏينهن تائين جاري رکيو ويو، روزاني بنيادن تي 15-17 g في 190-210 g جسماني وزن جي شرح تي.
2.5. وزن کڻڻ جي ماپ
OA انڊڪشن کان پوءِ، چوٿين جي پوئين عضون جي وزن کڻڻ جي صلاحيت جي ماپ شيڊول مطابق انڪاپيسيٽينس-ميٽر ٽيسٽر 600 (IITC لائف سائنس، ووڊلينڊ هيلز، CA، USA) سان ڪئي وئي. پوئين عضون تي وزن جي ورڇ جو حساب لڳايو ويو: وزن کڻڻ جي صلاحيت (٪)
